Jeroen MALFAIT 1, Melanie VANTIEGHEM 1, Stephane ROUGALE 2, Majda MAYEMI SAIFI 2, Marlène REYNAUD 2 e Veronique STOVE 1
1 Departamento de Medicina Laboratorial, Hospital Universitário de Ghent, Bélgica; 2 HORIBA Medical, Montpellier, França
Fundo
O Pentra XLR é uma nova geração de sistemas analíticos Pentra, capaz de realizar hemograma completo (CBC), análise diferencial de leucócitos em 5 partes (5 DIFF) e contagem de reticulócitos.
Os testes CBC e 5 DIFF baseiam-se em impedância, citoquímica e medição da absorbância da luz, utilizando a tecnologia do sistema sequencial hidrodinâmico duplo (DHSS). No Pentra XLR, a análise de reticulócitos por citometria de fluxo (RET) é realizada utilizando o corante laranja de tiazol. Reticulócitos jovens e imaturos apresentam fluorescência intensa, enquanto reticulócitos em maturação exibem intensidade de fluorescência intermediária ou baixa. A contagem automatizada de reticulócitos aumentou a acurácia e a precisão em comparação com as contagens manuais tradicionais e proporciona a capacidade de medir de forma confiável novos parâmetros de maturação por RET, como a fração de reticulócitos imaturos (IRF) e a medição do conteúdo de hemoglobina dos reticulócitos.
O objetivo da presente avaliação é determinar o desempenho analítico do novo analisador de células sanguíneas Pentra XLR. Os resultados fornecidos por este instrumento foram comparados com os obtidos pelo nosso analisador hematológico de rotina. Além disso, os resultados do RET foram comparados com um método de referência em um citômetro de fluxo de três lasers.
Materiais e métodos
O estudo consistiu em uma qualificação de desempenho.
Amostras de sangue
Amostras de sangue (K2-EDTA) da nossa rotina diária foram utilizadas para análises de hemograma completo com diferencial (n = 135) e teste de antígeno fecal (n = 213). As amostras foram selecionadas de forma a apresentarem 50% de resultados normais e 50% com alterações, com base nos critérios de avaliação do nosso analisador hematológico de rotina.
Qualificação de desempenho
- Reprodutibilidade: este protocolo segue a diretriz CLSI EP5-A2. A reprodutibilidade é avaliada em 3 níveis de controle: baixo, normal e alto, com ABX Difftrol para o modo DIFF e ABX Minotrol Retic para o modo RET, com 4 repetições/dia/nível.
- Repetibilidade: a imprecisão intra-ensaio foi avaliada com base em 12 medições consecutivas em 4 amostras analisadas no modo RET. O teste foi realizado em sangue normal.
- Precisão/comparação de métodos: os coeficientes de determinação e a análise de regressão de Passing e Bablok foram usados para avaliar a concordância do Pentra XLR com o analisador XE-5000 (Sysmex) para análise de hemograma completo + diferencial + RET, e com o kit BD Retic-Count™ no citômetro de fluxo BD FACSCanto II (Beckton Dickinson) para análise de RET.
Resultados do hemograma completo + 5 diferenciais
Reprodutibilidade da imprecisão
Os resultados de imprecisão entre execuções são apresentados na Tabela 1 para CBC+DIFF e na Tabela 3 para os parâmetros RET. Todos os resultados estavam dentro das especificações estabelecidas pelo fabricante.
| | | Contagem CBC | 5 DIFF contagens |
|---|
| | | leucócitos
10 9 /L | Hemácias
10 12 /L | HGB
g/dl | TCT
% | PLT
10 9 /L | LYM
10 9 /L | SEG
10 9 /L | NOVO
10 9 /L | EOS
10 9 /L | BAS
10 9 /L |
|---|
| Baixo | Valor médio
CV obtido %
CV esperado % | 2.33
2.74
5.00 | 2.44
2.01
3.00 | 6.56
1.79
2.50 | 19.80
2.56
5.00 | 66
6.18
15.00 | 0.69
7.01
8.00 | 0.04
28.10
40.00 | 1.35
3.91
8.00 | 0.18
23.36
25.00 | 0.07
5.77
8.00 |
|---|
| Normal | Valor médio
CV obtido %
CV esperado % | 7.08
2.00
4.00 | 4.75
2.13
2.50 | 13.63
1.54
2.00 | 38.80
2.39
4.00 | 256
4.01
10.00 | 2.22
4.07
8.00 | 0.19
9.79
20.00 | 4.05
2.72
6.00 | 0.37
13.02
15.00 | 0.24
3.67
8.00 |
|---|
| Alto | Valor médio
CV obtido %
CV esperado % | 16.66
1.68
3.00 | 5.31
1.84
2.50 | 16.58
1.36
1.80 | 46.53
2.19
3.00 | 521
2.34
7.00 | 2.72
3.49
8.00 | 0.48
11.06
15.00 | 11.77
1.98
4.00 | 0.97
7.61
10.00 | 0.72
2.54
8.00 |
|---|
Tabela 1: Reprodutibilidade do hemograma completo (CBC) e da contagem diferencial de 5 células no novo analisador Pentra XLR.
Modo DIFF de correlação
A comparação entre o Pentra XLR e o XE-5000 foi realizada em 135 amostras. Observou-se um alto grau de concordância entre os dois métodos, Pentra XLR e XE-5000, conforme estimado pelo coeficiente de determinação para RBC, WBC, HCT, HGB, LYM e PLT, R² ≥ 0,95 (Figuras 1-4).
