SPRi-Biochip™ 生物芯片和 SPRi-Slide™ 玻片式芯片是 SPRi 技术的核心。SPRi-Biochip 生物芯片由一个镀有一层薄金层的高折射率玻璃棱镜组成。SPRi-Slide 是一种覆盖薄金层的高折射率载玻片,可以借助高折射率匹配液与玻璃棱镜耦合,并在 SPRi 实验中代替 SPRi-Biochip 生物芯片使用。玻片式芯片通常在 SPRi 与另一种技术耦合时使用,因为玻片式芯片比 SPRi-Biochip 生物芯片更容易适应。
金属对于实现表面等离子体共振是必要的。除金外,也可以使用铝和银等其他金属,但在使用液体介质时,金的效果最佳。此外,使用金不存在氧化问题,且这种材料具备生物相容性。
裸金表面可以用来固定巯基化分子或设计你自己的表面化学。若配体未被巯基化,SPRi-Biochip 生物芯片表面需要功能化以固定配体。根据配体的性质选择合适的表面化学。自组装单层/多层(SAM)化学。这些 2D 表面化学是直接偶联的理想选择,适用于多种分子。
我们开发的 SAM 表面化学即时可用。相关配体可以是蛋白质(抗体、抗原和肽)、核酸(DNA、RNA)、糖类、聚合物或与生物素或 GST 结合的以上样品。下表总结了我们目录中可用的不同 SAM 表面化学。
CO 化学适用于固定具有胺基NH2 基团的分子。固定原理基于胱胺中硫原子对金的高亲和力,以及来自蛋白质(或肽)的游离胺基和醛分子(存在于戊二醛中)间的反应。在此过程中,形成亚胺键或席夫碱。胱胺和戊二醛间的键也是亚胺。
COe 化学是在CO 表面化学上再结合一层 Extravidin 。该表面化学适用于固定生物素标记的分子。Extravidin 通过形成席夫碱或亚胺键与戊二醛关联。生物素标记的配体通过 Extravidin 和生物素之间的特异性相互作用被固定。
CH 表面化学是指尚未活化的 POE 层。它对应 CS 化学的第一步。这种表面化学必须活化。这种表面化学也有两种密度:CH-HD(高密度)和 CH-LD(低密度)。
CSe 化学在CS 表面化学上再结合一层 Extravidin 。这种表面化学适用于生物素标记的分子。Extravidin 通过形成酰胺键与活化戊二醛关联。生物素标记的配体通过 Extravidin 和生物素之间的特异性相互作用被固定。
CTg 表面化学是在CO 表面化学上固定抗 GST 抗体。GST 标记配体固定化可以通过 GST 蛋白和抗 GST 抗体之间的特异性相互作用来实现。
Cep 表面化学适用于固定化具有伯胺基的分子。当生物分子连接到表面化学时,会产生稳定的共价键。
CS-EDA 表面化学适用于固定化具有羧基的分子。在这种结构中,固定的分子必须被活化以产生稳定的共价酰胺键。
CIm 表面化学适用于固定化具有 SH 基团的分子。在这种结构中,偶联官能团是马来酰亚胺基团,以产生稳定的共价硫醚键。
COa 表面化学是在CO 表面化学上连接蛋白 A 。蛋白 A 用于检测人或小鼠免疫球蛋白 IgG1 和 IgG2,它们的亲和力很高。蛋白 A 与 IgM、IgA、IgE 和 IgG3 的亲和力较低。蛋白 A 对人 IgG3和 IgD 以及小鼠 IgM、IgA 和 IgE 无已知亲和力。