DynaMyc – Le microscope de cartographie des durées de fluorescence

Vue d'ensemble

La microscopie de fluorescence est l’outil en vogue pour étudier les événements dynamiques à l’échelle des structures cellulaires et des nanomatériaux. Contrairement aux microscopes à fluorescence classiques, basés sur l’intensité de fluorescence, nos microscopes utilisent la durée de vie de fluorescence, une propriété intrinsèque des fluorophores. Sa mesure est donc insensible aux chargements non uniformes, au photoblanchiment, à l’instabilité de la lumière d’excitation et à la diffusion de la lumière. Autre avantage majeur : les mesures résolues en temps donnent des informations dynamiques essentielles relatives au micro-environnement d’un fluorophore et sur ses interactions avec les autres molécules. HORIBA Scientific, le leader de la spectroscopie de fluorescence, propose le modèle DynaMyc™, un système de microscopie confocal entièrement automatisé utilisant la technologie des filtres, afin de mesurer la durée de vie de fluorescence et l’intensité à des échelles microscopiques.

DynaMyc emploie la méthode de comptage des photons uniques corrélés en temps (TCSPC), une technique permettant l’acquisition rapide et sensible de durées de vie de luminescence allant de 100 ps à 100 µs. L’instrument est composé d’un module optique compact regroupant tous les composants optiques, et d’un microscope BX 51 Olympus. Ses fonctions de cartographie incluent notamment une platine de balayage rapide en X, Y et Z laquelle, combinée à la conception confocale, permet d’obtenir des cartes de durée de vie de fluorescence d’une résolution spatiale de l’ordre du micron.

Le DynaMyc est un outil de recherche souple : il propose un vaste choix de sources laser (Diode) émettant des impulsions d’une picoseconde couvrant les longueurs d’onde de 370 à 980 nm, ainsi que des cadences de répétition d’onde continue jusqu’à 100 MHz, le tout assorti de multiples configurations de filtres et de différentes options de détection permettant de répondre aux besoins de mesure spécifiques des utilisateurs. Une caméra refroidie (reduction du courant noir) présentant une plage dynamique élevée, ainsi qu’un illuminateur de fluorescence de haute intensité peuvent venir compléter le DynaMyc en lui conférant des capacités d’imagerie de fluorescence large champ.

Le système DynaMyc, entièrement automatique, est piloté via l’interface utilisateur intuitive de notre logiciel DataStation. Des analyses de reconvolution complètes peuvent être réalisées afin de produire des cartes des paramètres de régression tels que les durées de vie, les amplitudes relatives, la durée de vie moyenne et l’intensité de la fluorescence.

Le Dynamyc est par essence l’instrument idéal pour étudier la dynamique des protéines, notamment comment elles se lient et se dissocient, par transfert d’énergie de résonance de fluorescence (FRET).

Fonctions

  • Comptage de photons uniques (TCSPC), pour des durées de vie allant de 100 ps à 10 μs
  • Optique de mesure des durées de vie compacte et entièrement automatique, permettant le changement automatique des filtres, des filtres dichroïques et des trous confocaux
  • Couplage à fibre optique pour différentes diodes laser (de 370 à 980 nm)
  • Tête confocale avec sténopés automatiques (de 100 à 1000 μm)
  • Nouvelle diode laser (DeltaDiode™) équipée de lasers à cadences de répétition élevées (jusqu’à 100 MHz), fonctionnant en onde continue ou par impulsions
  • Logiciel d’acquisition et d’analyse intuitif
  • Algorithme FRET pour la mesure de l’efficacité du transfert et des distances moléculaires
  • Caméra de fluorescence refroidie en option, pour imagerie de fluorescence large champ

Fabriqué par HORIBA Scientific

Caractéristiques

Microscope
Objectifs

Trous confocaux

Basé sur le microscope Olympus BX51 vertical
Plan achromat. x10 et x60. D’autres grossissements sont disponibles.
Tourelle à 5 positions.
4 diamètres, de 100 μm à 1000 μm, motorisés et pilotés par ordinateur

Caméra
CCD USB couleur
Caméra de fluorescence


2 Mpix, 8 bits
1,4 Mpix, 12 bits refroidie (en option)

Sources d’excitation
Cadence de répétition
Plage de longueur d’onde

Sources laser pulsées à couplage fibre

De 10 kHz à 100 MHz avec les sources DeltaDiode™
De 370 nm à 980 nm.

Platine motorisée
Résolution
Course
Commande manuelle
Commande automatique


0.5 µm
75 x 50 mm
Par manette
Via le logiciel DataStation

Électronique TCSPC
Durées de vie mesurées

Détection par comptage des photons uniques

De 100 ps à 10 µs

Détecteur
Plage spectrale
Courant d’obscurité

Module de détection des photons à l’échelle picoseconde
185-650 nm / 300-850 nm
< 80 cps

Filtres
Filtres d’excitation
Filtres dichroïques

Filtres d’émission

Filtres ND


Filtres PB 10 nm, préalignés
6 positions
Motorisés, pilotés par ordinateur
6 positions : Filtres BP 40 nm
Motorisés, pilotés par ordinateur
6 positions : Diamètre extérieur 0, 0,3, 0,6, 1, 2 et 3
Motorisés, pilotés par ordinateur

Logiciel
Acquisition des données
Analyse des données
Système d’exploitation
Logiciel FRET


Logiciel DataStation
Logiciel DAS6, avec reconvolution en option
Windows XP / Windows Vista
Affichage de l’efficacité de transfert et de la distance moléculaire

Dimensions

140 cm x 90 cm x 80 cm

Schematics

Brochures

Dynamyc