
Résonance de Plasmons de Surface par imagerie (SPRi)
- Principe
La Résonance de Plasmons de Surface par imagerie (SPRi) est un procédé de détection optique qui se produit lorsqu’une lumière polarisée traverse un prisme (ou biopuce) recouvert d’une fine couche métallique (or). Sous certaines conditions (longueur d’onde, polarisation et angle d’incidence), les électrons libres à la surface de la biopuce absorbent les photons incidents et les convertissent en ondes de plasmons de surface. Ces conditions de SPR sont très sensibles et dépendent de l’indice de réfraction situé à la surface de la biopuce. Ainsi, si une interaction moléculaire se produit entre un ligand immobilisé sur la biopuce et un analyte (ou échantillon) injecté à la surface, l’indice de réfraction change et les conditions de SPR sont modifiées. Il est alors possible de suivre en temps réel une interaction moléculaire sans aucun marquage.
Plusieurs paramètres peuvent être étudiés et comparés dans une expérience unique : taux d'association, taux de dissociation, constante d'affinité, recouvrement de surface (pg/mm2, pmol/mm2…)…
Dans le format multiplex, ces paramètres peuvent être étudiés pour touts les ligands greffés sur la biopuce (jusqu'à 400 différents), simultanément et en temps réel.

- Avantages
- jusqu’à plusieurs centaines de ligands (plots) sur la biopuce
- Suivre l’interaction moléculaire de chaque plot simultanément et en temps réel
- Accéder à des informations quantitatives et qualitatives (courbes cinétiques et images) simultanément
- SPRi combinée à la spectrométrie de masse MALDI
- Combinaison de la SPRi et de l’analyse MALDI-MS : Analyse sur la même biopuce
- Analyse MS directement sur la biopuce SPRi en format matriciel : Sans récupération de l’échantillon
- Analyse au format multiplex de plusieurs échantillons : Gain en temps et en consommables
Applications

Profiling d’affinité
Grâce au procédé « étape à injection unique», l’affinité entre un analyte et différents ligands immobilisés à la surface de la biopuce peut être déterminée en effectuant uniquement une seule injection d’analyte (sans étape de régénération) – ce qui permet de réduire la consommation en échantillon et le temps de mesure

Etudes d’optimisation et de comparaison
Il est possible de tester différents paramètres tels que la concentration, le pH, le tampon sur une même biopuce afin d’optimiser les conditions expérimentales. Plusieurs plots réplicas peuvent être choisis afin d’avoir des mesures plus robustes.