Interesse da tecnologia HORIBA Medical Yumizen H1500/H2500 em pacientes com anormalidades na contagem diferencial de leucócitos (WBC-DIFF) devido a doenças hematológicas malignas ou tratamento quimioterápico.

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¹ P. Correia, ¹ J. Blanchi, ² F. Seguy ¹ F. Durrieu
¹ Laboratório de Biologia Médica, Institut Bergonié, Bordéus; ² HORIBA, Montpellier

Introdução

O HORIBA Medical Yumizen H1500/H2500 é um novo analisador hematológico automatizado que gera hemogramas completos com contagem diferencial de leucócitos (WBC). A maioria das amostras de pacientes com alterações hematopoiéticas aciona o alerta de contagem diferencial de leucócitos (WBC-Diff) devido à baixa capacidade de separação celular, necessitando de revisão da lâmina por microscopia para confirmar ou descartar a contagem diferencial de leucócitos. Neste estudo, avaliamos o desempenho do Yumizen H1500/H2500 na detecção de alterações na contagem diferencial de leucócitos em comparação com o nosso analisador de rotina HORIBA Medical Pentra Nexus, em pacientes com patologias ou tratamentos que afetam a hematopoiese (em quimioterapia com alterações nos parâmetros hematológicos ou com distúrbios onco-hematológicos).

Amostras, materiais e métodos

Duzentas e vinte e oito amostras com reflexo de lâmina de acordo com as regras padrão (regras ISLH e GFHC*) no Pentra Nexus foram sistematicamente reanalisadas em até 4 horas no Yumizen H1500/H2500. Cento e vinte e oito (56%) amostras eram de pacientes com distúrbio hematológico crônico e 100 (44%) de pacientes em quimioterapia para tumor sólido. A contagem diferencial foi realizada por microscopia óptica e citometria de fluxo de 10 cores. Um único tubo de citometria de fluxo (CD36-FITC, CD14-PE, CD13-ECD, HLA-DR-PC5.5, CD19-PC7, CD2-APC, CD71-AA700, CD16-AA750, CD294-PB, CD45-KO) foi sistematicamente processado e analisado em um citômetro Beckman-Coulter Navios para confirmar a contagem diferencial e identificar populações celulares normais ou anormais (monócitos, linfócitos anormais, blastos, granulócitos imaturos). O WBC-diff identifica grupos de células (linfócitos, neutrófilos, monócitos, eosinófilos) por meio da definição de um discriminador inferior e um discriminador superior. Alertas são gerados quando a distinção entre os grupos de células determinados é difícil ou impossível. No Pentra Nexus, os discriminadores são previamente configurados no software de análise, enquanto no Yumizen H1500/H2500 os discriminadores são variáveis e determinados por algoritmo para cada amostra.

^{*Grupo Francês de Hematologia Celular}

Resultados

Tabela 1: Comparação da frequência de alertas de leucócitos entre os 2 analisadores.

	Pentra Nexus	Yumizen H1500/H2500
Sinalizador de diferença total de leucócitos	66.7%	47.6%
Linfócitos atípicos	7.9%	4.8%
Linfócitos/neutrófilos sozinhos	10.1%	1.75%
Linfócitos/neutrófilos com qualquer outra sinalização	6.1%	5.3%
Neutrófilos anormais (isolados)	11.4%	11.8%
Monócitos anormais	10.1%	12.3%
NRBC	8.3%	3.1%

Figura 1: Exemplos representativos de melhor separação celular pelo algoritmo matricial Yumizen H1500/H2500 (B, D, F) em comparação com o Pentra Nexus (A, C, E):

A, B: amostra de paciente com linfoma não Hodgkin de células B

C, D: amostra de paciente em quimioterapia para carcinoma hepático.

E, F: amostra de paciente em quimioterapia para mieloma múltiplo

Figura 2: A citometria de fluxo confirma que a separação de monócitos é mais precisa no Yumizen H1500/H2500 (C, D) em comparação com Pentra Nexus (A, B).

Figura 3 e tabela 3: lâmina típica de células hematopoiéticas alteradas pós-quimioterapia (A), identificação das células por citometria de fluxo (vermelho = neutrófilos maduros, laranja = granulócitos imaturos, verde = monócitos, rosa = linfócitos) (B) e comparação da classificação celular (tabela 3).

Tabela 2: Comparação do desempenho de sinalização entre os 2 analisadores

	Pentra Nexus	Yumizen H1500/H2500
Falso positivo*	36.8%	25.2%
Especificidade	53.3%	69.3%
Precisão	63.2%	74.8%

* Falso positivo = sinalização que aciona a revisão da lâmina, mas sem alteração no resultado da diferença de leucócitos

Conclusão

Nosso estudo focou na detecção de leucócitos como gatilho para revisão microscópica de lâminas em pacientes com hematopoiese alterada. De modo geral, o analisador Yumizen H1500/H2500 demonstrou melhoria na análise diferencial de leucócitos e na confiabilidade em comparação com nosso analisador de rotina Pentra Nexus, além de maior precisão e uma redução significativa (-21%) na revisão morfológica desnecessária por microscopia, economizando tempo considerável em nosso laboratório.