O hemograma, também chamado hemograma completo, é em geral o primeiro exame solicitado pelos médicos para determinar o estado geral de saúde de um paciente. É um grupo de exames que avalia as células que circulam no sangue, incluindo hemácias, leucócitos e plaquetas. O hemograma pode avaliar o estado geral de saúde e ajuda a detetar uma variedade de doenças e afecções, como infecções, anemia e leucemia.
Os analisadores hematológicos de última geração realizam esses testes em minutos e fornecem uma interface essencial para o médico avaliar a condição do paciente. Eles também devem atender às demandas dos laboratórios atuais, incluindo maior produtividade, custos reduzidos e excelente serviço. É evidente que a qualidade da amostra a ser analisada é essencial para obter rapidamente um resultado válido. Amostras de baixa qualidade resultam em custos adicionais, erros e mais tempo para os médicos analisarem o resultado. A homogeneidade da amostra, obtida por meio da mistura adequada do sangue, é a chave para a qualidade dos resultados analíticos.
A maioria dos erros em medicina laboratorial ocorre nas fases pré e pós-analíticas do processo de teste. Técnicas incorretas flebotomia devido à falta de conhecimento são a principal causa de erros pré-analíticos (1). Em um estudo transversal com um total de 118.732 amostras, o erro mais comum observado foi o de amostras inadequadas, seguido por amostras coaguladas (Figura 1).
Figura 1: Prevalência e tipos de erros pré-analíticos em um hospital de atendimento terciário (2).
Outros erros incluem identificação incorreta, frascos inadequados, amostras diluídas e hemolisadas. O ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) é considerado o anticoagulante de escolha para hemogramas completos. O K2EDTA é recomendado pelo CLSI (3). O K3EDTA é a forma líquida do EDTA e diluirá a amostra em 1-2%. A mistura adequada do tubo de coleta de sangue após a coleta é uma etapa importante que garante que o aditivo do tubo esteja adequadamente misturado, que as amostras de sangue estejam homogêneas e que a qualidade e a integridade da amostra sejam mantidas (4).
Os fabricantes geralmente fornecem recomendações específicas sobre o número de inversões necessárias para obter a homogeneidade da amostra em um determinado tubo, ou seja, inversão suave do tubo de amostra pelo menos cinco a dez vezes. Por exemplo, no procedimento de velocidade de sedimentação eritrocitária, o Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI) recomenda um mínimo de 12 inversões completas com a bolha de ar percorrendo toda a extensão do tubo para tubos padrão (10-12 mm x 75 mm, contendo 5 mL de sangue e com uma bolha de ar que represente pelo menos 20% do volume do tubo)(5). A coleta diretamente em um tubo Vacutainer é ideal, mas difícil de ser realizada em pacientes pequenos ou pediátricos com veias de pequeno calibre, que colapsam facilmente. Nesse caso, a mistura inadequada pode resultar na formação de coágulos na amostra (microcoágulos)(6).
Amostras de origem biológica demonstram estabilidade limitada durante o armazenamento ao longo do tempo devido à perda de suas propriedades in vivo, bem como à degradação de seus elementos constituintes. As condições de coleta e transporte têm um impacto significativo na amostra de sangue. Isso exige a observação de condições de transporte mais rápidas e otimizadas, visto que, frequentemente, o local da flebotomia é diferente do local de processamento da amostra (7). Como as células sanguíneas e os fatores de coagulação são muito frágeis, cuidados especiais devem ser tomados durante todo o tempo de manipulação da amostra. Após essa fase pré-analítica, os laboratórios buscam obter os resultados mais confiáveis. Nesse momento preciso, a especificidade de certas amostras torna a homogeneização adequada antes da realização do teste crucial. Se não forem homogeneizadas corretamente, amostras com alta viscosidade ou taxas de sedimentação eritrocitária elevadas (a sedimentação é acelerada pelo aumento da concentração plasmática de proteínas de fase aguda, que estão aumentadas em casos de lesão tecidual aguda, inflamação crônica, infecção crônica e gravidez) ou amostras armazenadas em refrigerador podem gerar resultados errôneos.
Antes da análise, a homogeneização completa da amostra é realizada na maioria dos laboratórios utilizando diversos tipos de misturadores mecânicos. Antes da disponibilidade desses equipamentos, havia um debate entre hematologistas da velha guarda sobre o número de inversões manuais realizadas por meio de movimentos suaves de vaivém do pulso para alcançar a homogeneização das amostras de sangue. Alguns consideravam que cerca de 20 a 25 inversões manuais eram necessárias para obter a homogeneização completa da amostra (8, 9). Todo esse processo demanda tempo e pessoal de laboratório. Além disso, aumenta significativamente o tempo de processamento da amostra, atrasando a análise dos resultados e afetando o tempo de resposta. Em última análise, é o precioso tempo do paciente que acaba sendo desperdiçado.
Existem dois tipos de misturadores mecânicos: de balanço e rotativos. Os misturadores de balanço são eficientes quando há espaço livre suficiente para promover a mistura. No entanto, se o tubo de coleta de sangue estiver completamente cheio, a homogeneização da mistura é impedida. Assim, em um estudo, o valor da hemoglobina dobrou em comparação com o valor obtido uma semana antes, e as contagens de leucócitos e plaquetas foram significativamente reduzidas. Contudo, após a repetição da análise na mesma amostra quatro vezes, os resultados de hemoglobina, leucócitos e plaquetas foram comparáveis aos resultados obtidos na amostra do paciente uma semana antes. Aparentemente, a remoção de alíquotas de sangue durante as quatro análises repetidas criou espaço livre suficiente para que a bolha de ar se movesse e promovesse a homogeneização da mistura no misturador de balanço (8).
Portanto, o tubo de coleta de sangue deve ser examinado para verificar se há espaço livre suficiente para a mistura, especialmente quando são utilizados misturadores do tipo oscilante.
Figura 2: Módulo de mistura de quatro lados e leitura de código de barras nos analisadores Yumizen H1500/H2500
Para garantir a perfeita homogeneidade das amostras a serem analisadas e alcançar condições ideais para a obtenção de resultados precisos, os analisadores Yumizen H2500/H1500 são equipados com um módulo de rotação de cremalheira (tipo rotativo). Essa característica exclusiva consiste em uma mistura automática com rotação de 360 graus, garantindo a perfeita homogeneidade das amostras a serem analisadas.
Após o carregamento das bandejas no analisador, elas são transferidas para um módulo de mistura de quatro lados (Figura 2). A bandeja giratória comporta quatro bandejas (40 tubos de amostra), uma de cada lado. O sistema realiza no mínimo 40 inversões dos tubos antes da amostragem. Isso garante uma mistura homogênea para a medição.
Assim, no modo de rack, a mistura manual da amostra não é necessária, pois o instrumento realiza um ciclo automático de pré-mistura por rotação com duração de 1 minuto. Esse método de mistura implica em uma redução da carga de trabalho para a equipe do laboratório e proporciona uma preparação de amostra padronizada que melhora a qualidade e a confiabilidade dos procedimentos de medição.
Laboratórios de alto rendimento exigem a automação do fluxo de trabalho em hematologia e a capacidade de integração com outros sistemas. O módulo de mistura com rotação de 360 graus foi projetado para otimizar esse fluxo de trabalho, economizando tempo e aumentando a precisão.
Neste contexto, a solução HELO * é uma solução de automação projetada para atender às necessidades de uma plataforma de hematologia de alto rendimento, com recursos de gerenciamento de dados e tubos, resíduos, lâminas sanguíneas e digitalização.
* Organização de Laboratório Evolutivo HORIBA
A homogeneização é uma etapa crucial na coleta de uma amostra de sangue, mas também imediatamente antes da realização de um teste. Embora a homogeneização manual da amostra antes de inseri-la no analisador seja comum, a homogeneização automatizada de amostras de sangue é uma abordagem padronizada e que economiza tempo. Misturadores de agitação e rotativos são comumente usados para esse fim.
O exclusivo módulo de mistura rotativa integrado aos analisadores Yumizen H1500/H2500 realiza 40 inversões de tubos de amostra de sangue em um minuto. Ele foi projetado para atender à demanda de laboratórios de alto volume e priorizar a obtenção dos melhores resultados possíveis para o benefício do paciente.
Solução HELO (Organização Evolutiva de Laboratórios HORIBA)
1. A. Simundic, K. Bolenius, J.Cadamuro et al., Recomendação da EFLM para coleta de sangue venoso, v 1.1, outubro de 2017
2. P. Arul, M. Pushparaj et al. Prevalência e tipos de erro pré-analítico no laboratório de hematologia de um hospital terciário no sul da Índia, Journal of Laboratory Physicians, abril-junho de 2018;10(2):237-240.
3. Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI Guideline): Tubos e aditivos para coleta de amostras de sangue venoso; Padrão aprovado — Quinta edição H1-A5, Vol. 23 No. 33.
4. Diretriz do Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI): Validação, Verificação e Garantia de Qualidade de Analisadores Hematológicos Automatizados, Norma Aprovada - Segunda Edição, documento CLSI H26-A2 (ISBN 1-56238-728-6), 2010
5. Diretriz do Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI): Referência e Procedimento Selecionado para o Teste de Velocidade Sedimentação de Eritrócitos (VHS); Padrão Aprovado — Quarta Edição, H2-A4, Vol. 20 No. 27
6. B. De la Salle, Erros pré e pós-analíticos em hematologia, 19 de fevereiro de 2019
7. D. Wu, Y. Li e F. Wang. Por quanto tempo podemos armazenar amostras de sangue: uma revisão sistemática e meta-análise. Elsevier BioMedicine. Outubro de 2017; 24: 277–285.
8. S. Narayanan, Questões pré-analíticas relacionadas à mistura de amostras de sangue, outubro de 2005.
9. S. Narayanan. Questões pré-analíticas em hematologia. Journal of Laboratory Medicine, 2003; 27: 243-48
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