Przygotowywanie rozmazów

W połączeniu z analizatorem hematologicznym Yumizen H2500, system Yumizen SPS może wykonywać następujące operacje:

■ ROZMAZ: przygotowanie rozmazu krwi z próbki
■ BARWIENIE: przygotowanie i barwienie rozmazu krwi

Charakterystyka rozmazywania

Preparaty rozmazów krwi są wykonywane metodą klinową, z wykorzystaniem zjawiska napięcia powierzchniowego krwi, według profilu rozprowadzania próbki zdefiniowanego przez użytkownika.

Zasady klina rozmazującego

Profil do rozmazywania składa się z następujących regulowanych parametrów:

• Objętość kropli (maksymalna wartość to 5 μL).
• Kąt nachylenia klina na suwaku (40° lub 45°).
• Czas, w którym klin pozostaje w kontakcie z kroplą przed wykonaniem rozmazu (maksymalnie 2000 ms).
• Prędkość rozmazywania (maksymalnie 5000 kroków/s).

Taśma rozmazująca

• Pojemność (liczba slajdów): 6000
• Czysta część taśmy smarującej dla każdego nowego slajdu
• Zarządzanie oprogramowaniem do konserwacji i pojemności taśm
• Regulacja naciągu taśmy za pomocą oprogramowania

Protokoły barwienia

Protokół May-Grünwald Giemsa (MGG)
Technika barwienia polichromatycznego, w której wykorzystuje się dwa barwniki składające się z dwóch składników: alkalicznego i kwasowego:

• Barwnik 1 to May-Grünwald: łączy kwaśną eozynę i zasadowy błękit metylenowy.
• Plama 2 to barwnik Giemsy, zawierający zasadowy barwnik błekit metylenowy, eozynian-lazuru.

Tworzą stabilizowany roztwór obojętny, który zostaje dezaktywowany pod wpływem alkoholu.

Pierwszym etapem barwienia jest utrwalenie krwi alkoholem zawartym w czystym roztworze May-Grünwald. Barwienie rozpoczyna się po dodaniu buforu. Składniki komórkowe są selektywnie barwione, zgodnie z ich indywidualnym składem chemicznym:

1. błękit metylenowy: barwi na niebiesko kwaśne składniki komórki.
2. eozyna: barwi na pomarańczowo-czerwono zasadowe składniki komórki.
3. błękitny: barwi na czerwono i fioletowo podstawowe składniki komórkowe.

Wyniki barwienia zależą od poziomu kwasowości buforu (bardziej czerwone przy obniżonym pH, bardziej niebieskie przy wzroście pH).

Protokół Wrighta
Barwnik Wrighta to polichromatyczna substancja barwiąca, składająca się z mieszaniny eozyny i błękitu metylenowego. Po nałożeniu na komórki krwi, barwniki te wytwarzają wiele kolorów w zależności od ładunku jonowego barwnika i różnych składników komórki.

Jony eozyny mają ładunek ujemny i barwią podstawowe składniki komórki na kolor pomarańczowy do różowego. Jony błękitu metylenowego mają ładunek dodatni i barwią kwaśne składniki komórki na różne odcienie niebieskiego.

Neutralne składniki komórki ulegają zabarwieniu pod wpływem obu składników barwnika, co skutkuje powstaniem zmiennych kolorów.