Morfologia krwi (FBC), zwana również pełną morfologią krwi (CBC), jest zazwyczaj pierwszym badaniem zlecanym przez lekarzy w celu określenia ogólnego stanu zdrowia pacjenta. Jest to grupa badań oceniających komórki krążące we krwi, w tym czerwone krwinki (RBC), białe krwinki (WBC) i płytki krwi (PLT). Morfologia krwi może ocenić ogólny stan zdrowia i pomaga w wykrywaniu różnych chorób i schorzeń, takich jak infekcje, anemia i białaczka.
Najnowocześniejsze analizatory hematologiczne wykonują te testy w ciągu kilku minut i stanowią niezbędny interfejs dla lekarza do oceny stanu pacjenta. Muszą one również spełniać wymagania współczesnych laboratoriów, zapewniać najwyższą wydajność, niskie koszty i łatwość w obsłudze. Niewątpliwie jakość analizowanej próbki jest kluczowa dla szybkiego uzyskania prawidłowego wyniku. Niska jakość próbki wiąże się z dodatkowymi kosztami, błędami i wydłużeniem czasu analizy wyników przez lekarzy. Jednorodność próbki uzyskana poprzez odpowiednie wymieszanie próbki krwi jest więc kluczem do dobrej jakości wyników analitycznych.
Większość błędów w medycynie laboratoryjnej występuje w fazach przed- i poanalitycznych procesu badawczego. Nieprawidłowe techniki pobrania krwi wynikające z braku świadomości są główną przyczyną błędów przedanalitycznych (1). W badaniu przekrojowym obejmującym łącznie 118 732 próbki, najczęściej obserwowanym błędem były nieodpowiednie próbki, a następnie próbki ze skrzepem (ryc. 1).
Rycina 1: Częstość występowania i rodzaje błędów przedanalitycznych w szpitalu trzeciego stopnia referencyjności (2).
Inne błędy to błędna identyfikacja, nieprawidłowe fiolki oraz rozcieńczone i zhemolizowane próbki. Kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA) jest uważany za antykoagulant pierwszego wyboru w morfologii krwi. CLSI zaleca stosowanie K2EDTA (3). K3EDTA to płynna postać EDTA, która rozcieńcza próbkę o 1–2%. Prawidłowe wymieszanie krwi w probówce po pobraniu krwi jest ważnym krokiem, który zapewnia odpowiednie wymieszanie dodatku, jednorodność próbek krwi oraz zachowanie jakości i integralności próbki (4).
Producenci często podają szczegółowe zalecenia dotyczące liczby odwróceń wymaganych do uzyskania jednorodnej próbki dla danej probówki, tj. delikatnego odwrócenia probówki z próbką co najmniej pięć do dziesięciu razy. Na przykład, w procedurze OB, Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI) zaleca co najmniej 12 pełnych odwróceń, podczas których pęcherzyk powietrza przemieszcza się od końca do końca probówki w przypadku standardowych probówek (10-12 mm x 75 mm, zawierających 5 ml krwi i z pęcherzykiem powietrza stanowiącym co najmniej 20% objętości probówki) (5). Pobranie bezpośrednio do pojemnika próżniowego jest optymalne, ale trudne do osiągnięcia u małych pacjentów lub pacjentów pediatrycznych z małymi żyłami, które łatwo zapadają się. W takim przypadku nieodpowiednie mieszanie może prowadzić do krzepnięcia próbki (mikroskrzepów) (6).
Próbki pochodzenia biologicznego wykazują ograniczoną stabilność podczas przechowywania przez dłuższy czas ze względu na utratę ich właściwości in vivo oraz degradację składników. Użyty antykoagulant i warunki transportu mają istotny wpływ na próbkę krwi. Wymaga to zapewnienia szybszych i lepszych warunków transportu, ponieważ często miejsce pobrania krwi jest oddalone od miejsca przetwarzania próbki (7). Ponieważ komórki krwi i czynniki krzepnięcia są bardzo delikatne, należy zachować szczególną ostrożność przez cały czas obchodzenia się z próbką. Po tej fazie przedanalitycznej laboratoria chcą dołożyć wszelkich starań, aby uzyskać jak najbardziej wiarygodne wyniki. W tym momencie, ze względu na specyficzność niektórych próbek, prawidłowe wymieszanie przed wykonaniem badania ma kluczowe znaczenie. Nieprawidłowe wymieszanie próbek o wysokiej lepkości lub o wysokiej szybkości sedymentacji erytrocytów (sedymentacja jest przyspieszana przez wzrost stężenia białek ostrej fazy w osoczu, które wzrasta w przypadku ostrego uszkodzenia tkanek, przewlekłego stanu zapalnego, przewlekłej infekcji i ciąży) lub próbek przechowywanych w lodówce może dawać błędne wyniki.
Przed analizą, w większości laboratoriów, za pomocą różnorodnych mieszadeł mechanicznych, przeprowadza się pełną homogenizację próbki. Zanim pojawiły się one na rynku, wśród hematologów starej daty toczyła się debata na temat liczby ręcznych inwersji wykonywanych delikatnymi ruchami nadgarstka w przód i w tył w celu uzyskania jednorodności próbek krwi. Niektórzy z nich uważali, że do uzyskania pełnej homogenizacji próbki potrzeba około 20–25 ręcznych inwersji (8, 9). Cały ten proces jest czasochłonny i wymaga zaangażowania personelu laboratoryjnego. Dodatkowo, znacznie wydłuża to czas przetwarzania próbki, opóźniając analizę wyników i wpływając na czas realizacji. Ostatecznie marnowany jest cenny czas pacjenta.
Istnieją dwa rodzaje mieszadeł mechanicznych: kołyskowe i obrotowe. Mieszadła kołyskowe są wydajne, gdy dostępna jest wystarczająca ilość wolnej przestrzeni nad roztworem, aby umożliwić mieszanie. Jednakże, jeśli probówka do pobierania krwi jest całkowicie wypełniona, mieszanie do uzyskania jednorodności jest niemożliwe. W jednym z badań wartość hemoglobiny podwoiła się w porównaniu z wartością uzyskaną tydzień wcześniej, a liczba białych krwinek i płytek krwi uległa znacznemu obniżeniu. Jednakże, po czterokrotnym powtórzeniu analizy tej samej próbki, wyniki dotyczące hemoglobiny, leukocytów i płytek krwi były porównywalne z wynikami uzyskanymi tydzień wcześniej dla próbki pacjenta. Najwyraźniej, usunięcie alikwot krwi podczas czterech powtórzonych analiz stworzyło wystarczającą przestrzeń nad powierzchnią, aby pęcherzyki powietrza mogły się poruszać i uzyskać jednorodne wymieszanie w mieszadle kołyskowym (8).
W związku z tym należy sprawdzić, czy w probówce do pobierania krwi znajduje się wystarczająca ilość miejsca na wymieszanie, zwłaszcza w przypadku stosowania mieszadeł kołyskowych.
Rysunek 2: Moduł mieszania czterostronnego i odczytu kodów kreskowych w analizatorach Yumizen H1500/H2500
Aby zapewnić idealną jednorodność analizowanych próbek i uzyskać optymalne warunki do uzyskania precyzyjnych wyników, analizatory Yumizen H2500 / H1500 są wyposażone w moduł obrotu statywu (typu obrotowego). Ta unikalna funkcja polega na automatycznym mieszaniu obrotowym o 360 stopni, co zapewnia idealną jednorodność analizowanych próbek.
Po załadowaniu statywów do analizatora, są one przenoszone do modułu mieszania z czterech stron (rysunek 2). Obrotowa taca może pomieścić cztery statywy (40 probówek), po jednej z każdej strony. System wykonuje co najmniej 40 odwróceń probówki przed pobraniem próbki. Dzięki temu uzyskuje się jednorodną mieszaninę do pomiaru.
W trybie statywów ręczne mieszanie próbki nie jest konieczne, ponieważ urządzenie wykonuje automatyczny cykl mieszania wstępnego poprzez obrót, który trwa 1 minutę. Ta metoda mieszania zmniejsza obciążenie personelu laboratoryjnego i zapewnia wystandaryzowane przygotowanie próbki, co poprawia jakość i niezawodność procedur pomiarowych.
Laboratoria o dużej przepustowości wymagają automatyzacji procesu badań hematologicznych i możliwości integracji z innymi systemami. Moduł mieszania obrotowego o 360 stopni został zaprojektowany w celu optymalizacji tego procesu, oszczędzając czas i zwiększając precyzję.
W tym kontekście rozwiązanie HELO * to rozwiązanie automatyzacyjne zaprojektowane tak, aby spełnić potrzeby platformy hematologicznej o dużej przepustowości, obejmujące zarządzanie danymi i probówkami, odpadami, rozmazami krwi i cyfryzacją.
* HORIBA Ewolucyjna Organizacja Laboratoryjna
Mieszanie jest kluczowym etapem zarówno podczas pobierania próbki krwi, jak i tuż przed wykonaniem badania. Ręczne mieszanie próbki przed umieszczeniem jej w analizatorze jest powszechne, ale automatyczne mieszanie próbek krwi to znormalizowane i oszczędzające czas podejście. W tym celu powszechnie stosuje się mieszadła kołyskowe i obrotowe.
Unikalny, obrotowy moduł mieszający zintegrowany z analizatorami Yumizen H1500/H2500 wykonuje 40 obrotów statywów z próbkami krwi w ciągu jednej minuty. Został zaprojektowany z myślą o potrzebach laboratoriów o dużej przepustowości, które koncentrują się na uzyskiwaniu jak najlepszych wyników dla dobra pacjenta.
HELO Solution (HORIBA Organizacja Laboratoriów Ewolucyjnych)
1. A. Simundic, K. Bolenius, J.Cadamuro et al., EFLM Recommendation for venous blood sampling, v 1.1, October 2017
2. P. Arul, M. Pushparaj et al. Prevalence and types of preanalytical error in hematology laboratory of a tertiary care hospital in South India, Journal of Laboratory Physicians, Apr-Jun 2018;10(2):237-240.
3. Clinical & Laboratory Standards Institute(CLSI Guideline): Tubes and Additives for Venous Blood Specimen Collection; Approved Standard —Fifth Edition H1-A5,Vol. 23 No. 33.
4. Clinical & Laboratory Standards Institute(CLSI Guideline): Validation, Verification, and Quality Assurance of Automated HematologyAnalyzers, Approved Standard - Second Edition, CLSI document H26-A2 (ISBN 1-56238-728-6), 2010
5. Clinical & Laboratory Standards Institute (CLSI Guideline): Reference and Selected Procedure for the Erythrocyte Sedimentation Rate (ESR) Test; Approved Standard—Fourth Edition, H2-A4, Vol. 20 No. 27
6. B. De la Salle, Pre- and postanalytical errors in haematology, 19 February 2019
7. D. Wu, Y. Li, and F. Wang. How Long can we Store Blood Samples: A Systematic Review and Meta-Analysis.ElsevierBioMedicine. 2017 Oct; 24: 277–285.
8. S. Narayanan, Preanalytical issues related to blood sample mixing, Oct 2005.
9. S. Narayanan. Preanalytical issues in hematology. Journal of Laboratory Medicine, 2003; 27: 243-48
Globalne rozwiązanie hematologiczne
Analizator Hematologiczny
Masz pytania lub prośby? Skorzystaj z tego formularza, aby skontaktować się z naszymi specjalistami.
