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Ajudando você a liberar todo o potencial de suas vesículas extracelulares. Portfólio de técnicas de caracterização comprovadas e inovadoras.
O que são veículos elétricos?
As vesículas extracelulares (VEs) são pequenas estruturas membranosas liberadas por diversos tipos de células. Elas podem ser encontradas em vários fluidos corporais, incluindo sangue, urina e saliva. Sabe-se que desempenham papéis cruciais na comunicação intercelular e podem conter uma variedade de moléculas bioativas, como proteínas, lipídios e ácidos nucleicos. Dada a sua importância tanto em processos fisiológicos normais quanto em estados patológicos, o interesse na análise das VEs tem aumentado.
Os primeiros experimentos em que as EVs foram estudadas começaram na década de 80. O interesse por essas vesículas vem crescendo desde então, com um desenvolvimento exponencial da área nas últimas duas décadas.
A análise de EVs pode envolver uma ampla gama de técnicas essenciais para caracterizar o tamanho, a concentração e o conteúdo das EVs, bem como para identificar os tipos celulares específicos que as liberam. Além disso, a análise de EVs pode fornecer informações sobre os mecanismos pelos quais as EVs são absorvidas pelas células receptoras e os efeitos biológicos que induzem.
As vesículas extracelulares (VEs) podem ser amplamente classificadas em três categorias com base em sua biogênese e tamanho.
Exossomos: São pequenas vesículas extracelulares (VEs) (30-150 nm) derivadas da via endossomal. São formadas pela invaginação da membrana endossomal e subsequente fusão de corpos multivesiculares (MVBs) com a membrana plasmática. Os exossomos transportam diversas biomoléculas, incluindo proteínas, lipídios e ácidos nucleicos, e estão envolvidos na comunicação intercelular e no transporte de cargas.
Microvesículas: São vesículas extracelulares (VEs) maiores (100-1000 nm) formadas pela brotação externa da membrana plasmática. As microvesículas transportam uma variedade de moléculas bioativas, incluindo fatores de crescimento, citocinas e lipídios sinalizadores. Elas estão envolvidas na comunicação intercelular, na regulação imunológica e na coagulação sanguínea.
Corpos apoptóticos: São vesículas extracelulares (VEs) grandes (1-5 µm) liberadas por células em processo de morte celular programada (apoptose). Os corpos apoptóticos carregam uma gama diversificada de moléculas, incluindo cromatina, enzimas e organelas celulares. Eles estão envolvidos na remoção de células apoptóticas por fagócitos e na manutenção da homeostase tecidual.
Podemos considerar EVs pequenos (<200 nm) e EVs médios/grandes (<200 nm).
Elas estão envolvidas em diversos processos fisiológicos e patológicos, e pesquisadores têm estudado extensivamente suas potenciais aplicações na medicina e biotecnologia. As vesículas extracelulares têm uma ampla gama de usos em diversas áreas, e seu potencial terapêutico está sendo explorado em muitos estudos pré-clínicos e clínicos.
Comunicação intercelular: as vesículas extracelulares (VEs) desempenham um papel importante na comunicação intercelular, transferindo moléculas biológicas, como proteínas, lipídios e ácidos nucleicos, entre as células. Esse processo pode influenciar diversos processos fisiológicos e patológicos, incluindo a resposta imune, a regeneração tecidual e a progressão do câncer.
Marcadores diagnósticos: As vesículas extracelulares (VEs) podem servir como marcadores diagnósticos para diversas doenças, pois contêm biomoléculas que refletem o estado fisiológico da célula de origem. Por exemplo, já foi demonstrado que as VEs circulantes contêm biomarcadores para câncer e doenças neurodegenerativas, e sua análise pode auxiliar no diagnóstico e prognóstico dessas doenças.
Administração de fármacos: as vesículas extracelulares (VEs) podem ser projetadas para administrar moléculas terapêuticas, como fármacos ou ácidos nucleicos, às células-alvo. Elas oferecem diversas vantagens em relação aos sistemas tradicionais de administração de fármacos, incluindo alta biocompatibilidade, baixa imunogenicidade e a capacidade de atravessar barreiras biológicas.
Engenharia de tecidos: as vesículas extracelulares (VEs) podem promover a regeneração e o reparo de tecidos modulando o comportamento celular e as vias de sinalização. Elas têm sido utilizadas em diversas aplicações de engenharia de tecidos, incluindo regeneração óssea, reparo de cartilagem e cicatrização de feridas.
Os instrumentos HORIBA Scientific podem auxiliar na caracterização de vesículas extracelulares (VEs) de diversas maneiras:
Os sistemas de análise de rastreamento de nanopartículas (NTA) da HORIBA podem medir com precisão o tamanho e a concentração de EVs. O NTA é uma ferramenta poderosa para análise de EVs, pois permite a medição simultânea do tamanho e da concentração de partículas em tempo real. Além disso, o uso de marcação fluorescente com NTA possibilita a discriminação de diferentes subpopulações de EVs com base em seu conteúdo biomolecular.
O potencial zeta das vesículas extracelulares (VEs) pode fornecer informações valiosas sobre sua carga superficial e estabilidade. Os analisadores de potencial zeta da HORIBA podem medir o potencial zeta das VEs, permitindo que os pesquisadores entendam como as VEs interagem com outras estruturas biológicas. nanoPartica SZ-100V2 também pode fornecer informações sobre o tamanho das vesículas extracelulares.
A espectroscopia Raman é uma poderosa técnica analítica que pode ser usada para identificar a composição química de veículos elétricos. Essa técnica é ideal para a caracterização de veículos elétricos, pois permite obter espectros de alta resolução com preparação mínima da amostra.
A espectroscopia Raman pode ser combinada com a técnica AFM (TERS) para uma análise mais eficiente e para obter informações químicas e estruturais em nanoescala, bem como a distribuição topográfica, tornando a plataforma AFM-Raman uma ferramenta poderosa.
O método de fluorescência A-TEEM permite a rápida identificação molecular, a diferenciação de tipos de exossomos, a detecção de contaminantes e o estudo da biodistribuição de vesículas extracelulares. Trata-se de uma ferramenta não destrutiva e sem marcadores, insensível a muitos excipientes comuns, porém hipersensível a proteínas e, consequentemente, a vesículas extracelulares. Os perfis A-TEEM proporcionam uma melhor compreensão das assinaturas proteicas em matrizes complexas. Isso torna A-TEEM uma ferramenta valiosa para o controle de qualidade e análise de processos.
O principal interesse da imagem por Ressonância de Plásmon de Superfície (SPR) reside na sua capacidade de fornecer informações sobre a presença de marcadores de superfície específicos. Essas informações podem ser utilizadas para distinguir diferentes subpopulações de vesículas extracelulares (VEs), que podem apresentar funções biológicas distintas.
Fornecendo soluções para a área de ciências da vida usando analisadores espectroscópicos (Leitura nº E55)
READOUT é uma revista técnica publicada pela HORIBA.
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