DLS e Potencial Zeta de Proteínas

Proteínas

As proteínas são compostos orgânicos formados por aminoácidos dispostos em uma cadeia linear e dobrados em uma forma globular. Os aminoácidos em uma proteína são unidos por ligações peptídicas entre os grupos carboxila e amino de resíduos de aminoácidos adjacentes. A sequência de aminoácidos em uma proteína é definida pela sequência de um gene, que é codificada no código genético. Em geral, o código genético especifica 20 aminoácidos padrão que são usados para criar proteínas. Logo após ou mesmo durante a síntese, os resíduos em uma proteína são frequentemente modificados quimicamente por modificação pós-traducional, que alteram as propriedades físicas e químicas, o dobramento, a estabilidade, a atividade e, em última análise, a função das proteínas.

A maioria das proteínas se dobra em estruturas tridimensionais únicas. A forma que uma proteína assume naturalmente é conhecida como sua conformação nativa. A estrutura de uma proteína pode ser representada usando diferentes formas, como mostrado abaixo para a proteína triose fosfato isomerase. A figura à esquerda é uma representação de todos os átomos, coloridos por tipo de átomo. No meio, há uma representação simplificada ilustrando a conformação da cadeia principal, colorida por estrutura secundária. À direita, há uma representação da superfície acessível ao solvente, colorida por tipo de resíduo (resíduos ácidos em vermelho, resíduos básicos em azul, resíduos polares em verde e resíduos apolares em branco).

Análise do tamanho das partículas e do potencial zeta de proteínas

O tamanho de uma proteína é uma característica física importante que fornece informações úteis, incluindo a presença de monômeros, dímeros e trímeros, alterações na conformação, estado de agregação e desnaturação. Cientistas da área de proteínas geralmente discutem o "tamanho da proteína" ou peso molecular, em vez de usar a expressão "tamanho da partícula", mas analisadores de tamanho de partículas são frequentemente usados em seus estudos. Há também interesse na carga superficial ou valência das proteínas, portanto, o potencial zeta é outra medida usada por químicos de proteínas. A técnica de análise de tamanho de partículas mais comum para a caracterização de proteínas é a dispersão dinâmica de luz. O potencial zeta pode ser medido usando dispersão de luz eletroforética ou espectroscopia eletroacústica.

Tamanho das partículas de lisozima

A lisozima é uma proteína comum que pode ser difícil de analisar em baixas concentrações. Esta Ficha de Dados Aplicação apresenta os resultados do tamanho de partícula da lisozima medidos a uma concentração de 0,1 mg/mL.

Visualização da lisozima

Ficha técnica Aplicação: Medição de lisozima com o SZ-100

Aplicação: Medição do potencial zeta de proteínas

O potencial zeta é um parâmetro físico fundamental que descreve a carga superficial das proteínas. Embora haja interesse na medição do potencial zeta de proteínas há muitos anos, as medições eram frequentemente difíceis devido a uma série de fatores, incluindo a "cozimento" das proteínas nos eletrodos da célula quando se utilizavam técnicas mais antigas de espalhamento de luz. O analisador de nanopartículas SZ-100V2 utiliza eletrodos revestidos com carbono patenteados em células descartáveis para medição do potencial zeta, o que minimiza os problemas encontrados na medição do potencial zeta de proteínas.