Análise de agregação e tamanho de proteínas

Agregação de proteínas

O estudo da agregação de proteínas abrange uma ampla gama de interações e mecanismos. Muitos estudos nessa área investigam a agregação de proteínas mal enoveladas, que se acredita ser responsável por muitas doenças degenerativas. Como a agregação geralmente leva a uma alteração física no tamanho da proteína, a análise do tamanho de partículas tem se mostrado uma técnica experimental útil nesse campo. Embora a dispersão dinâmica de luz (DLS) seja amplamente utilizada para caracterizar proteínas, em muitos casos os agregados são grandes demais para serem medidos com precisão por essa técnica. O analisador de tamanho de partículas por difração a laser LA-960 possui a capacidade única de medir de 10 nanômetros a 5 milímetros, detectando com precisão os agregados e, em alguns casos, o tamanho da proteína primária.

Medição de agregados grandes com o LA-960

Para cientistas da área de proteínas, é de particular interesse quantificar o tamanho, o volume e o número de agregados em um determinado material. O analisador de tamanho de partículas LA-960V2 fornece medições precisas do tamanho e do volume de agregados entre 10 nanômetros e 5 milímetros em concentrações ultrabaixas para dispositivos tradicionais de difração a laser.

Um exemplo de resultado é mostrado na figura abaixo, utilizando material da FDA (Administração de Alimentos e Medicamentos dos EUA).

Dados de exemplo mostrando o tamanho da proteína primária e agregados acima de 1 mícron. Resultados obtidos com o LA-960.

Medição da dinâmica de agregação de proteínas com DLS

Diversos tipos de estudos são possíveis com um instrumento de espalhamento dinâmico de luz, como o Analisador de Nanopartículas SZ-100V2. Novamente, como a agregação geralmente pode ser detectada pela alteração do tamanho das partículas, o SZ-100 é útil para agregados menores que um determinado tamanho crítico, no qual o movimento browniano ainda predomina sobre a sedimentação gravitacional. Estudos adicionais podem ser realizados com o SZ-100 para caracterizar como fatores como temperatura, pH, salinidade, surfactante e tempo afetam o enovelamento de proteínas.

A dispersão dinâmica de luz (DLS) é agora amplamente utilizada para estudar a agregação de proteínas, conforme descrito nas notas de aplicação abaixo.