Agregación de Proteínas y Análisis de Tamaño

Agregación de proteínas

El estudio de la agregación de proteínas abarca una amplia gama de interacciones y mecanismos. Muchos estudios sobre esta área investigan la agregación de proteínas mal plegadas, que se considera responsable de muchas enfermedades degenerativas. Dado que la agregación suele provocar un cambio físico en el tamaño de la proteína, el análisis del tamaño de partículas ha demostrado ser una técnica experimental útil en este campo. Aunque la dispersión dinámica de la luz (DLS) se utiliza ampliamente para caracterizar proteínas, en muchos casos los agregados son demasiado grandes para medirse de forma fiable mediante esa técnica. El analizador de tamaño de partículas de difracción láser LA-960 posee la capacidad única de medir desde 10 nanómetros hasta 5 milímetros, detectando con precisión los agregados y, en algunos casos, el tamaño principal de la proteína.

Medición de grandes agregados con el LA-960

De particular interés para los científicos de proteínas es cuantificar el tamaño, volumen y número de agregados en un material concreto. El analizador de tamaño de partículas LA-960V2 proporciona una medición precisa del tamaño y volumen para agregados entre 10 nanómetros y 5 milímetros a concentraciones ultrabajas para dispositivos tradicionales de difracción láser.

Un ejemplo de resultado se muestra en la figura siguiente utilizando material de la FDA de EE. UU.

Ejemplos de datos que muestran el tamaño de la proteína primaria y los agregados superiores a 1 micra. Resultados obtenidos con el LA-960.

Medición de la dinámica de agregación de proteínas con DLS

Con un instrumento de dispersión dinámica de luz es posible realizar muchos tipos diferentes de estudios, como el analizador de nanopartículas SZ-100V2. De nuevo, debido a que la agregación puede detectarse típicamente cambiando el tamaño, el SZ-100 es útil para agregados menores que un cierto tamaño crítico donde el movimiento browniano sigue dominando el asentamiento gravitatorio. Se pueden realizar estudios adicionales con el SZ-100 para caracterizar cómo factores como la temperatura, el pH, la salinidad, el tensioactivo y el tiempo afectan al plegamiento de proteínas.

La dispersión dinámica de la luz (DLS) se utiliza ahora ampliamente para estudiar la agregación de proteínas, como se describe en las notas de aplicación a continuación.