A-TEEM ™ significa adquisición simultánea de Absorbancia, Transmitancia y Matriz de Excitación y Emisión de Fluorescencia (EEMs). Es una técnica analítica novedosa, robusta y extremadamente sensible. A-TEEM presenta los mejores atributos de la espectroscopía molecular (velocidad, bajo coste por medición y colocación de laboratorio a línea) y cromatografía (sensibilidad, selectividad, límites bajos de detección y cuantificación).
El nuevo Paquete de Cumplimiento A-TEEM de HORIBA ofrece soluciones para el registro de registros, validación de métodos y verificación de instrumentos para cumplir con los requisitos regulatorios.
El propio nombre refleja las dos técnicas que se combinan para este método 2 en 1:
A-TEEM Características:
A-TEEM es una técnica ecológica que promueve la sostenibilidad en comparación con la mayoría de los enfoques basados en la separación. Sin embargo, A-TEEM rivaliza con la cromatografía en la cuantificación de matrices complejas. Debido a su rapidez y bajos costes por medida, ha sustituido a los métodos estándar de separación para mediciones rutinarias en alimentos y farmacéuticos.
Los datos de absorbancia UV/Vis recogidos simultáneamente con EEMs corrigen para el IFE, resultando en perfiles de A-TEEM independientes de la concentración y proporcionan linealidad en un rango de concentración más amplio (normalmente hasta ~2 unidades de absorbancia). Estas A-TEEM huellas moleculares son independientes de la concentración, a diferencia de los EEM recogidos de fluorómetros de barrido tradicionales, y abren la puerta al análisis cuantitativo rutinario con A-TEEM, como se ha demostrado en alimentos y farmacéuticos.
La tecnología propietaria de A-TEEM de HORIBA permite la adquisición simultánea de tres modalidades: EEMs de fluorescencia, mediciones de absorbancia para análisis multicomponente y mediciones de transmisión para colorimetría CIE.
Adquisición simultánea 3 modalidades – Extracto de arándano
Estas tres modalidades resultan en la determinación de cinco características individuales que, juntas, crean la huella dactilar única, altamente selectiva e A-TEEM independiente de la concentración, que puede utilizarse para el cribado y la clasificación.
A-TEEM contornos capturan sutiles variaciones en la estructura molecular de compuestos muy similares, lo que resulta en huellas moleculares únicas independientes de la concentración que pueden utilizarse para identificar y cuantificar componentes de la muestra. Los isómeros de cresol se resuelven rápidamente con A-TEEM, junto con análisis multivariante, que se adquirieron en segundos.
A-TEEM cuenta con una extensa y exitosa historia analítica en investigación ambiental sobre agua, con muchas aplicaciones, incluyendo la medición de materia orgánica disuelta coloreada (CDOM), el análisis de aceite en agua e incluye un método de la Sociedad Americana de Pruebas y Materiales (ASTM) para benceno, tolueno, etilbenceno y xileno (BTEX).
A-TEEM es especialmente adecuado para la identificación y cuantificación de biomoléculas complejas. Los aminoácidos aromáticos se distinguen fácilmente por huellas únicas de A-TEEM y son muy sensibles al entorno local. Por lo tanto, A-TEEM pueden utilizarse para la caracterización y cuantificación de proteínas que contienen tirosina, triptófano y fenilalanina. Por ejemplo, cambios sutiles en la estructura secundaria o en la interacción con el ADN se reflejan en cambios en la A-TEEM huella molecular. A diferencia de otras técnicas espectroscópicas como Raman, NIR o FT-IR, A-TEEM es insensible al agua y a azúcares simples, lo que le permite abordar formulaciones de muy baja concentración como muchas vacunas.
A-TEEM se ha utilizado para diferenciar vacunas multicomponentes, clasificar compuestos vacunales basándose en la sustitución de aminoácidos, modificación posterior a la traducción y estado de agregación. Además de proporcionar un modelo cuantitativo de la relación AAV vacío-lleno, A-TEEM también pudo distinguir entre serotipos AAV. Además, también se han diferenciado exosomas de diferentes células cancerosas usando A-TEEM.
A-TEEM se ha utilizado para determinar la calidad de los medios basales y de alimentación, para monitorizar bioprocesos y para monitorizar reacciones.
A-TEEM es ideal para el análisis cuantitativo y cualitativo de componentes en matrices complejas. Las moléculas que importan a la biofarmacéutica y a los productos naturales (proteínas, coenzimas, terpenos, vitaminas, subproductos de la contaminación bacteriana, etc.) pueden identificarse y cuantificarse, y moléculas como el agua y los azúcares simples que no tienen fluorescencia nativa no aportan señal.
A-TEEM también es sensible a metabolitos (NADH, NAD(P)H), vitaminas, componentes coloreados, hidrolizados, agregación y micotoxinas.
Muchas de estas muestras son difíciles para cromatografía y espectroscopía vibracional, pero pueden realizarse con A-TEEM con una preparación mínima de la muestra, bajo uso de disolventes y otros consumibles.
A-TEEM se ha utilizado para realizar análisis cuantitativos en muchos analitos de interés, rastreando componentes en el vino para reemplazar perfiles de calidad a 10 horas por una medición de 1 minuto, como medida de frescura en productos oleosos, detectando moho en granos y detectando evidencias de adulteración económica en múltiples productos naturales.
En comparación con los métodos cromatográficos convencionales, A-TEEM tiene la capacidad de reducir significativamente los tiempos de medición con una preparación mínima de la muestra. A-TEEM supera muchos de los puntos de dolor asociados con la cromatografía (HPLC, LC-MS, GC, GC-MS):
A-TEEM ventajas sobre la cromatografía
A-TEEM comparte las siguientes fortalezas con la cromatografía:
En comparación con la espectroscopía vibracional, A-TEEM es extremadamente sensible y específica, con la capacidad de realizar mediciones cuantitativas y cualitativas en muestras en el rango de ppb, órdenes de magnitud inferior a lo habitual en espectroscopía vibracional. A-TEEM supera muchos de los puntos de dolor asociados con la espectroscopía vibracional (Raman, FT-IR, NIR):
A-TEEM beneficios sobre la espectroscopía vibracional
A-TEEM comparte fortalezas que hacen que la espectroscopía vibracional sea la principal capacidad analítica para la analítica de procesos:
En comparación con un EEM tradicional, la técnica A-TEEM proporciona una mejor especificidad molecular y, por tanto, es más adecuada para el análisis quimiométrico tanto para aplicaciones analíticas cuantitativas como cualitativas. A-TEEM supera las principales limitaciones de un EEM tradicional:
Los espectrofluorómetros de barrido tradicionales recogen fluorescencia 3D en forma de matrices de emisión de excitación, o EEMs, un contorno de la intensidad de fluorescencia en función tanto de la longitud de onda de excitación como de la longitud de onda de emisión. Muchos artículos científicos publicados citan el uso de espectrofluorómetros de barrido para el análisis de componentes de EEE de fluorescencia en alimentos, agua y farmacéuticos.
Existen limitaciones fundamentales de los fluorómetros tradicionales de PMT de barrido:
El método A-TEEM de HORIBA supera estas tres limitaciones. Utilizando detectores CCD, se puede adquirir un EEM de fluorescencia completo en segundos, resolviendo el problema de las velocidades de medición lentas. Para resolver el problema de la modelización cuantitativa, se utilizan espectros de absorbancia detectados simultáneamente para corregir IFE, lo que resulta en huellas moleculares de A-TEEM independientes de la concentración para LoQs en el rango de ppb. Estos datos de absorbancia y transmisión también pueden utilizarse para la caracterización de muestras, permitiendo caracterizar compuestos no fluorescentes.
Figura 1. Diagrama de contorno tridimensional visto desde un ángulo de un EEM de fluorescencia, con un eje tridimensional para excitación, emisión e intensidad de fluorescencia.
Figura 2. Diagrama de contorno (vista cenital) del EEM de fluorescencia de fluoresceína adquirido en un segundo con el Duetta equipado con A-TEEM.
Aqualog A-TEEM el análisis quimiométrico presentado aquí se derivan del software Eigenvector Research Incorporated, Solo.
Descubre perspectivas sin precedentes sobre la calidad del agua y la salud ambiental
A-TEEM Espectroscopía
Desbloqueando la innovación entre disciplinas
Accesorio Autosampler de Aqualog A-TEEM
Tiene alguna pregunta o solicitud? Utilice este formulario para ponerse en contacto con nuestros especialistas.
