Fig.15: SPRi-Biochip holder, glass prism, SPRi-Biochip and SPRi-Slide
SPRi-Biochip™ 生物芯片和 SPRi-Slide™ 玻片式芯片是 SPRi 技术的核心。SPRi-Biochip 生物芯片由一个镀有一层薄金层的高折射率玻璃棱镜组成。SPRi-Slide 是一种覆盖薄金层的高折射率载玻片,可以借助高折射率匹配液与玻璃棱镜耦合,并在 SPRi 实验中代替 SPRi-Biochip 生物芯片使用。玻片式芯片通常在 SPRi 与另一种技术耦合时使用,因为玻片式芯片比 SPRi-Biochip 生物芯片更容易适应。
金属对于实现表面等离子体共振是必要的。除金外,也可以使用铝和银等其他金属,但在使用液体介质时,金的效果最佳。此外,使用金不存在氧化问题,且这种材料具备生物相容性。
裸金表面可以用来固定巯基化分子或设计你自己的表面化学。若配体未被巯基化,SPRi-Biochip 生物芯片表面需要功能化以固定配体。根据配体的性质选择合适的表面化学。自组装单层/多层(SAM)化学。这些 2D 表面化学是直接偶联的理想选择,适用于多种分子。
Fig.16: 2D surface chemistries available.
我们开发的 SAM 表面化学即时可用。相关配体可以是蛋白质(抗体、抗原和肽)、核酸(DNA、RNA)、糖类、聚合物或与生物素或 GST 结合的以上样品。下表总结了我们目录中可用的不同 SAM 表面化学。
Fig.17: Immobilization of a ligand on a CO sensor Biochip.
CO 化学适用于固定具有胺基NH2 基团的分子。固定原理基于胱胺中硫原子对金的高亲和力,以及来自蛋白质(或肽)的游离胺基和醛分子(存在于戊二醛中)间的反应。在此过程中,形成亚胺键或席夫碱。胱胺和戊二醛间的键也是亚胺。
Fig.18: Immobilization of a ligand on a COe sensor Biochip.
COe 化学是在CO 表面化学上再结合一层 Extravidin 。该表面化学适用于固定生物素标记的分子。Extravidin 通过形成席夫碱或亚胺键与戊二醛关联。生物素标记的配体通过 Extravidin 和生物素之间的特异性相互作用被固定。
Fig.19: Immobilization of a ligand on a CS-HD or CS-LD sensor Biochip.
CH 表面化学是指尚未活化的 POE 层。它对应 CS 化学的第一步。这种表面化学必须活化。这种表面化学也有两种密度:CH-HD(高密度)和 CH-LD(低密度)。
Fig.20: Immobilization of a biotinylated ligand on a CSe sensor Biochip.
CSe 化学在CS 表面化学上再结合一层 Extravidin 。这种表面化学适用于生物素标记的分子。Extravidin 通过形成酰胺键与活化戊二醛关联。生物素标记的配体通过 Extravidin 和生物素之间的特异性相互作用被固定。
Fig.21: Immobilization of a GST-tagged ligand on a CTg sensor Biochip.
CTg 表面化学是在CO 表面化学上固定抗 GST 抗体。GST 标记配体固定化可以通过 GST 蛋白和抗 GST 抗体之间的特异性相互作用来实现。
Fig.22: Immobilisation of ligand on a Cep sensor Biochip.
Cep 表面化学适用于固定化具有伯胺基的分子。当生物分子连接到表面化学时,会产生稳定的共价键。
Fig.23: Immobilization of ligand on a Cs-EDA sensor Biochip.
CS-EDA 表面化学适用于固定化具有羧基的分子。在这种结构中,固定的分子必须被活化以产生稳定的共价酰胺键。
Fig.24
CIm 表面化学适用于固定化具有 SH 基团的分子。在这种结构中,偶联官能团是马来酰亚胺基团,以产生稳定的共价硫醚键。
Fig.25: Orientated immobilization of antibodies on a COa sensor Biochip.
Fig.26: Orientated immobilization of antibodies on a COg sensor Biochip.
COa 表面化学是在CO 表面化学上连接蛋白 A 。蛋白 A 用于检测人或小鼠免疫球蛋白 IgG1 和 IgG2,它们的亲和力很高。蛋白 A 与 IgM、IgA、IgE 和 IgG3 的亲和力较低。蛋白 A 对人 IgG3和 IgD 以及小鼠 IgM、IgA 和 IgE 无已知亲和力。
Fig.27: Scheme of the hydrogel structure according to the density and the thickness.
We offer 3D surface chemistries based on carboxylmethyl dextran at high, medium and low densities. A 3D surface chemistry is a hydrogel in which ligands can be nested. The thickness of the hydrogel can be chosen (between 200 or 50 nm). The configuration of the experiment is thus closer to “in solution” as in 2D surface chemistries. The link between the hydrogel and the ligand is based on amine coupling.