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胰岛素结构及稳定性评估

Multivariate analysis of different insulin proteins

在不同 pH(4.5、7.4、8.5)和温度下,蛋白质浓度为 4 mg/mL 的人胰岛素、甘精胰岛素和门冬胰岛素的 PARAFAC 多变量分析的组分 EEM 评分图。 每组 5 个点代表在 5、20、25、30、37 摄氏度的温度下按顺序在每种 pH 值和胰岛素类型下测量的数据。

众所周知,胰岛素是一种由胰腺产生的蛋白质激素,是基本代谢过程中所必需的激素。对于胰岛素的稳定性和聚集性等性能检测显得尤为重要,已有文献报道了通过荧光激发发射矩阵(EEMs)和紫外-可见吸收光谱(UV-Vis)来研究。[1]目前,商业治疗胰岛素主要分为两类: 速效胰岛素和长效胰岛素。相比于长效胰岛素,速效胰岛素在蛋白质序列中只有1到3个残基。因此,可利用胰岛素序列上的差异以及储存和输送时控制的pH值,触发或阻止血液中胰岛素二聚体和六聚体形成。聚集物的形成可减缓身体吸收胰岛素,而聚集物的缺乏则可加速胰岛素的吸收。[2]蛋白质结构的变化,例如与胰岛素药代动力学相关的结构,可以用荧光发射光谱,紫外-可见吸收光谱或二者结合来测量。无论哪种测量技术,其本质就是测量荧光氨基酸的变化。 紫外-可见分光光度计和荧光分光光谱仪是两台典型的独立仪器。在本篇报告中,我们提出一种新的快速测试方法,在生成所有荧光样品组份的激发和发射光谱的同时,可得到紫外可见吸收光谱,并且可校正由浓度引起的内滤效应(IFE)的影响,从而获得更准确的光谱信息[3]

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